"Хибридни папир / ПДМС микрофлуидни уређај интегрисан са екстракцијом РНА и аминовање полимеразе рекомбиназе за откривање Норовируса у ХРАНИ ИСПРЕДНОСТИ
Норовирус (Хунов) припада породици Цалицивиридае и пре свега се преноси путем контаминиране хране. То је водећи узрок акутног гастроентеритиса.
Вирусна болести Центар Института даме Давис на МцГилл универзитету у Канади заједнички је објавио истраживање о сродном студију детекције. Истраживачки тим развио је Мицрофлуидински уређај заснован на оригами и користио је Мурине Норовирус 1 (МНВ -1) за низ експеримената испитивања. Уређај упија РНА помоћу папирне траке, појачава РНА користећи изотермалну технологију мира мулти-ензимске технологије брзе нуклеинске киселине и врши бочну анализу протока на папирној траци. Цео процес откривања и резултати су визуализовани, са завршеним тестом у року од 35 минута, постизање 100% специфичности и ограничење детекције од 200 ПФУ / мЛ. Овај уређај показује значајан потенцијал за откривање вируса прехрани у пољопривредним производима, посебно у окружењу са ограниченим и ресурсима.
Експериментална метода
Целулозне папирне траке апсорбоване су Мнв -1 РНА, која је затим пуштена у реагенс Мира. РНА је први пут преписана у комплементарни ДНК (цДНА), а затим се појачала у двоструки ДНК (ДСДНА). Након тога, сонде су посебно везане за циљни редослед. Након што је остатак тетрахидрофуран (ТХФ) цепана ендонуклеасе ИВ, преостали прамен је продужио полимеразу да би се добио комплетан амплијски. Амплицсон је заробљен и визуализован као промена боје на Т-линији.
(Шематски дијаграм експерименталног принципа)
Развојна достигнућа
(Шематски дијаграм папира / ПДМС микрофлуидичког уређаја)
Истраживачки тим развио је склопиви микрофлуидни уређај папира / ПДМС који интегрише више функција, укључујући екстракцију нуклеинске киселине, изотермалне амплификације нуклеинске киселине и визуелно детекцију. Овај уређај неприметно интегрише цео процес, од припреме узорка на крајњу тачку МНВ -1.
Микрофлуидни уређај завршава откривање у року од 35 минута, са ограничењем детекције од 200 ПФУ / мЛ. Трошкови сваког микрофлуидног уређаја израчунате се на 6,76 долара, што га чини најисплативији начин међу свим познатим методама откривања које користи истраживачки тим.
Експериментални значај
Истраживачки тим је даље оценио перформансе овог микрофлуидног уређаја за откривање МНВ-а -1 у салату и малини. Они су увели сирове МНВ -1 РНА извлачене у свеже пољопривредне узорке, елиминишући потребу за сложеним вађењем и корацима прочишћавања вируса. Уређај је открио 170 ПФУ / Г у салату и 230 ПФУ / Г у малину.
(Осетљивост мнв -1 детекције у салату и малинама користећи микрофлуидни уређај)
Традиционалне молекуларне методе за откривање вируса у храни, као што су ПЦР и КПЦР, захтевају вирусе високе чистоће, што чине процес елуције вируса, концентрације и пречишћавањем сложених матрица. Поред тога, традиционалне методе захтевају компликовану, гломазну и скупу опрему, чинећи их неприкладним за употребу у окружењима ограничених ресурса.
Овај уређај има значајну вредност за брзо откривање хутова и других вируса у храни у ланцу снабдевања храном.
Подаци о чланку
Часопис: Примењена и еколошка микробиологија
Назив чланка: Хибридни папир / ПДМС микрофлуидни уређај интегрисан је са РНА екстракцијом и аминовањем полимеразе рекомбиназе за откривање норовируса у храни
Фактор утицаја: 3.9
Истраживачки тим: Центар за вирусне болести, Институт Лади Давис, Универзитет МцГилл