Систем РПА-ЦРИСПР/Цас12а у овој студији постиже брзо (30–40 мин), ултра-осетљиво (1 копија/μЛ) ХЦМВ детекцију циљањем на рани-изражени УЛ123 ген, надмашујући конвенционалне методе у тестирању клиничких узорака. Ова иновација омогућава посебно{1} правовремену{1} дијагнозу{9} инфекције са малим оптерећењем код имунокомпромитованих пацијената, и наглашава изводљивост дијагностике засноване на ЦРИСПР-у за побољшање лечења болести повезаних са ХЦМВ{12}}. Једноставност и ефикасност теста истичу његов потенцијал као-алатка-за бригу о подешавањима са ограниченим ресурсима-.
Обрасци места за појачавање РПА и избор комплета.
(А) РПА дизајн прајмера у вези са локацијом фрагмената амплификације. Стрелице показују основне позиције од почетка до краја амплификованог фрагмента са П1-П6 прајмерима.
(Б) Слика електрофорезе агарозног гела производа РПА појачана са 6 ХЦМВ прајмера.
(Ц) Провера ефикасности амплификације РПА комплета различитих компанија. П: Пример, НЦ: Негативна контрола.
Резултати су показали да је комплет АмпФутуре показао највећу ефикасност амплификације.
Поређење позитивних стопа МИРА-ЦРИСПР/Цас12а, ПЦР - методе флуоресцентне сонде и кПЦР у клиничким узорцима.
Прикупили смо узорке крви и урина од 48 клиничких пацијената. Геномска ДНК је екстрахована из ових узорака коришћењем ТИАНамп Геномиц ДНК комплета, а резултати детекције УЛ122 су анализирани ПЦР-методом флуоресцентне сонде. Упоређујући наше резултате са клиничким дијагнозама, наше методе су идентификовале 6 позитивних узорака који су били негативни у клиничким тестовима.
