Акутне респираторне инфекције су уобичајене респираторне болести код деце, често узроковане вирусима. Респираторни синцитијски вирус (РСВ) и респираторни аденовирус (адв) су две уобичајене патогене које изазивају акутне респираторне инфекције код деце. Благи случајеви могу изазвати заједничке хладне симптоме као што су кашаљ и цурење носа, док тешки случајеви могу изазвати тешке компликације као што су пнеумонија и отитис медији. Према препорукама Светске здравствене организације, откривање патогена мора бити брз, тачан, осетљив и специфичан и не би се требао ослонити на специјализоване техничаре или велике инструменте. Стога је посебно важно развити метод детекције за РСВ и адв који може да испуни горе наведени захтеви за откривање.
Истраживачка група директора МА ДОНГЛИ Института за педијатрију дечије болнице Схензхен објавила је чланак "Мултиплекс рекомбиназа полимеразног испитивања амплификације у комбинацији са Цриспр / ЦАС12А за откривање респираторног синцитираног вируса и респираторног аденовируса" у часопису "Научни извештаји", у часопису "Научни извештаји".
Преглед истраживања
Изотерална технологија више-ензимске технологије за амплификацију нуклеинске киселине Мира је у комбинацији са системом детекције ЦХИСПР / ЦАС. Дизајнирањем Мира Пример-а и Цриспр РНас (ЦРРНАС), обављајући више поређења секвенци, оптимизацију реакционих услова и коришћењем флуоресцентних нумеричких уређаја за откривање да би се потврдила осетљивост и специфичност.
И употреба резултата КПЦР-а као упоредна контрола, проучава се доследност резултата испитивања 160 клиничких узорака грла.
Експериментални резултати
1. Осетљивост и специфичност методе детекције Мира-ЦрисПР / ЦАС12А
У детекцији методе Мира, РСВ-Ф1 / Р1 Пример пара се користи за појачавање нуклеинских киселина из узорка грла, АДВ, ПИВ, РХВ, МП, ЦП, ФЛУБ, ХМПВ, ФЛУА или РСВ / АДВ. Осим РСВ и Адв, који су имали појачане бендове, остали резултати били су негативни, што указује да су одабрани Мира Прајмери нису укрштени са осталим тестираним од осталих осам патогена и били су добро очувани.
Након тога, РСВ и АДВ рекомбинантни плазмиди су разређени 10 -имес користећи стерилну воду, а ограничења за откривање за РСВ и Адв је била и 106Копије / мл.
(1-10: ГЛАВНИ БЛАБ Узорци пацијената са РСВ, РСВ / Адв ко-инфекцијама и осталих респираторних патогених узорака)
2. Упоредите са КПЦР-ом
У поређењу са методом КПЦР-а, границе детекције РСВ и АДВ су 103 копије / мл
(Осетљивост детекције КПЦР РСВ и адв)
Метода Мира-Цриспр је погоднији за лабораторије са кратким временом откривања, једноставном операцијом и нема потребе за великим размерама КПЦР инструмената за завршетак експерименталних операција.
3. Поређење клиничких узорака
Узорци преплави грла сакупљени су од 160 деце са акутним респираторним инфекцијама. Истовремено, поступци Мира-Цриспр и КПЦР коришћени су за откривање и резултати су упоређени са резултатима клиничког испитивања.
У поређењу са методом КПЦР-а, осетљивост на Мира-ЦрисПР методе за РСВ и Адв је била 98,1% и 91,4%, а специфичност детекције је била 1 0 0%. Каппа вредност је већа од 0,95, што указује на висок степен конзистентности.
Мира-ЦрисПР метода има предности брзе, осетљиве и специфичне детекције РСВ и адв. То може брзо и тачно препознати вирусне инфекције и погодније је за употребу у областима са оскудним медицинским ресурсима.