Стафилокок хаемолитицус је грам-позитивна коагулазна-негативна бактерија која је у болницама веома уобичајено. Посљедњих година, инфекције стечене болнице су примиле све већу пажњу због свог вишег ризика. Стафилокок хемолитицус може даље изазвати инфекције коже, менингитисом, перитонитисом, па чак и сепсе. Кашњења у клиничкој дијагнози могу довести до погоршања здравственог стања, тако да је брза дијагноза С. Хаемолитицус кључно за прецизно лечење.
Истраживачки тим учитеља Ји Туо из централне лабораторије од Министарства одбране Лијаниунганг, Кина је објавила чланак "Брзо и визуелно откривање стафилокока хемолитицус у клиничким узорцима са Мира-ЛФС-ом" у часопису "Аналитица Цхимица Ацта" Аналитица Цхимица Ацта ".
1.Ресеарцх Преглед
У овој студији је основана метода Мира-ЛФС заснована на МВАА гену за откривање стафилокока хемолитицус. Технологија изотермалне технологије брзе нуклеинске киселине Мира је комбинована са бочним проточним траком ЛФС да би се постигла брза откривање патогена.
Експеримент је спроведен у 37 степени, а резултати се могу открити у року од 9 минута. Осетљивост откривања је била 0. 147ЦФУ / Реакција.
Метода детекције Мира-ЛФС погодна је за детекцију фиксне тачке хемолитицуса стафилокока у клиничким узорцима, реализујући ПоОЦТ методу за идентификацију стафилокока хемолитицус-а, што је од велике вредности за брзу дијагнозу и третман болести у областима са подземним медицинским услугама.
Истраживачки тим користио је Мира-ЛФС, КПЦР и традиционалне методе бактерије за анализу 95 случајних клиничких узорака и потврдила клиничку примену.
2.Ресеарцх методе
Висока дијаграма детекције Мира-ЛФС приказана је горе.
Истраживање је користило АМП-Будуће БИОТЕЦХ ДНК изотермални брз амплификациони комплет (колоидни златни тест трака) и тест за откривање нуклеинских киселина.
Дужина прајмера ГАНЕ МВАА је 30-35 нуклеотиди, а дужина производа појачања је 100-350 БП. Дизано је укупно 6 пара кандидатских прајмера. Анализа Мира изведена је коришћењем ГДНА стандардних сојева хемолитицуса Стапхилоцоццус, примењивани су прајмери кандидата, а производи за појачање су приказани помоћу 2% агарозне гел електрофорезе.
Затим дизајнирајте сонду на основу секвенце према напредним прајмерима (продужавајући 16 бп уназад). Крај сонде 5 'био је означен са ФИТЦ-ом и 3' крај је означен са блокирањем Ц3. Користите ТХФ да бисте заменили 31 нуклеотид у сонди. ТХФ је 30 бп са 5 крајева и 15 бп са 3 'крај. 5 'Крај одабраног обрнутог прајмера означен је биотином.
Штавише, истраживачки тим оптимизовао је реакционе услове за детекцију Мира-ЛФС-а хемолитицус стафилокока. Тест на 37 степени у интервалима од 2 минута од 4 до 12 минута. Резултати се приказују у време реакција од 8 минута и тестна линија је јасно видљива. Поред тога, тестови се спроводе у интервалима од 5 степени од 22-52 степена. 37-42 Дипломирао је најприкладнија температура за детекцију Мира-ЛФС-а. Стога је оптимално време реакције и температура методе Мира-ЛФС за стафилокок хемолитицус 8 мин и 37 степени, респективно. Заједно са коначним резултатом који је визуализован ЛФС-ом у року од 1 минуте, укупно време откривања је 9 минута.
3. Екпеперименталне резултате
Верификација осетљивости
Анализа Мира-ЛФС-а изведена је у различитим концентрацијама геномског ДНК (ГДНА) добијених од серијски разблажених култура стафилокока хемолитицус култура (1 0 ^ 6-10 ^ 0 ЦФУ / мЛ).
Вероватноћа регресијска анализа јединице показала је да је 95% ЛОД утврђено од стране Мира-ЛФС тестова 0. 147 ЦФУ / реакција.
Провера специфичности
Анализом 18 заједничких патогених микробних сојева и 15 клиничких сојева хемолитицус хемолитицус, селективност Мира-ЛФС откривања стафилокока хемолитицус. Резултати су показали да је Мира-ЛФС тест негативан за 18 других патогених бактерија и позитиван за 15 верификованих клиничких узорака стафилокока хемолитицус.
Детекција Мира-ЛФС-а је високо селективна и погодна за скрининг хемолитицус стафилокока.
Стварни тестирање узорака
Лианиунганг Болница другог народа насумично је сакупила 95 узорака, укључујући 35 узорака коже и меког ткива, 16 узорака урина, 14 узорака у узорима и 30 узорака крви.
Резултати су показали да је метода детекције 100% у складу са методом КПЦР-а. Поред тога, у поређењу са златним стандардом (ГБ / Т4789. 11-2003), осетљивост и специфичност методе детекције Мира-ЛФС за идентификацију инфекције хемолитицус стафилокока била је 100% и 98,73%, респективно. Ови резултати су даље проверили техничку изводљивост ове методе у откривању хемолитицуса стафилокока у клиничким узорцима.
Метода Мира-ЛФС користи се за брзо откривање ХЕМОЛИТИЦУС-а за брзу поцт. То је ефикасна, тачна, једноставна и ниска цена и помаже у доношењу брзе дијагнозе и одлуке о лечењу.
Сазнајте о Мира технологији
АМП-ФУДУЋНОСТ МУЛТИ-ЕНСИМЕ изотермална технологија амплификације нуклеинске киселине појачава нуклеинске киселине на константној температури од 39 степени -42 степена, с временом реакције 5-20 минута. Поред тога, нису потребни строги лабораторијски услови, а сценарији пријаве су разнолики: општа лабораторијска одељења, примарна нега, кућно тестирање, поља итд.
Облици производа реагенса су разнолики: прах сушени смрзавањем, микросфере сушене смрзавањем итд.; Резултати приказивања су разнолики: гел електрофореза, флуоресцентна крива, колоидни златни тест тракице итд. Реагенс има стабилне перформансе, лако је радити и погодно је за складиштење и транспорт.
Помоћу Мира-а као основне технологије платформе, развила је низ пратећих производа као што су "ултра-брзо-канални изотермни детектор", "двоканални изотермни флуоресцентни детектор", "интегрисани потпуно аутоматски затворени систем за затварање", "само тестирање јелачке киселине детекције", итд. Креирајте целокупно раствор за брзо молекуларне детекције ".