Овде успоставите сЦРАМ (субоптимал протоспацер суседни мотив (ПАМ)-посредовану ЦРИСПР РНК и Цас12а нуклеазу у комбинацији са мултиензимском изотермном брзом амплификацијом), брзу дијагностичку платформу-без екстракције која детектује АСФВ у року од 20 минута. сЦРАМ интегрише корак брзог ослобађања нуклеинске киселине (40 степени, 5 мин) са реакцијом у једној-епрувети која комбинује мултиензимску изотермну амплификација (МИРА) и субоптимални ПАМ{{8}посредовани ЦРИСПР/
Цас12а систем (37 степени, 15 мин), омогућава-бесплатно визуелно очитавање помоћу УВ светла или трака бочног протока (ЛФС).сЦРАМ показује осетљивост на детекцију једне{5}}копије и не показује унакрсну-реактивност са пет уобичајених патогена свиња (ПРРСВ, ППВ, ЈЕВ). Процена 111 симулираних и клиничких узорака (укључујући крв, плазму и брисеве) открила је 100% подударност са кПЦР за УВ очитавање и 98,20% за ЛФС
очитавање, при чему обе методе показују 100% специфичност. Једноставност, брзина и прилагодљивост на терену сЦРАМ-а наглашавају његов потенцијал за децентрализовани надзор АСФВ у окружењима са-ограниченим ресурсима, нудећи моћан алат за сузбијање епидемије.


У овој студији смо развили сЦРАМ, брзу{0}}платформу за откривање АСФВ-а која се може применити на терену и која интегрише субоптимални ПАМ-посредовани ЦРИСПР/Цас12а са мултиензимском изотермном амплификацијом. Тест постиже осетљивост у једној-копији 1 копија/уЛ у року од 20 минута и не показује унакрсну-реактивност са главним патогенима код свиња. Клиничка валидација узорака крви, плазме и брисева показала је потпуну усклађеност са кПЦР коришћењем очитавања УВ светла и 98,20% тачности преко трака са бочним протоком. Са поједностављеним радом, високом осетљивошћу и специфичношћу и визуелном интерпретацијом резултата, сЦРАМ нуди снажан потенцијал за-надзор АКС-а на лицу места и шире апликације{12}}за{13}}у дијагностику неге.





